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液相色谱柱的柱长及内径的选择要点分享

更新时间:2022-08-18   点击次数:642次
  液相色谱柱在使用前,要进行柱的性能测试,并将结果保存起来,作为评价柱性能变化的参考。在做柱性能测试时要按照出厂报告中的条件进行,只有这样,测得的结果才有可比性。
 
  液相色谱柱的柱长及内径的选择:
 
  长度的选择:柱越长,总柱效越高(n值越大),柱越长,分析时间也越长。250—300mm是普遍的柱长,实验室一半以上的工作都是采用此规格柱子,一般用来分离l0到50个组份的中等至复杂混合物;500—600mm,要求较高分辨率的应用,—般用来分离大于50个组份或包含有难分离物质的复杂样品程序升温分析。
 
  内径:柱效率与柱半径平方成反比,内径越小柱效越高,但内径越大,柱容量也增加,允许进样量就越多。当进样量超过柱容量时,则因柱内每块理论板内不能建立真正的平衡,将会导致色谱蜂畸变,柱分辨率降低,重现性不好。因此对于复杂样品需要准确分离,必须使用小内径柱子。另一方面若样品中存在具有很不相同浓度组份化合物,为了增加样品容量就必须使用内径大的柱子,目前实验室使用常见的柱子内径一般是4.6mm。
 
  一般选择原则:分析大分子量化合物选择大孔径;对于高pH值或者碱性化合物需要选择高封端或者特殊封端的色谱柱,以改善峰形,延长使用寿命等。
 
  现在商品化的液相色谱柱琳琅满目,根据参数可以给我们提供一个初步的选择,但由于各个仪器厂商的填料技术和键合技术都有差异,即使都是C18柱,同一品牌不同系列都有不同的功能,有能耐受低pH值的、有耐高温的、有适合碱性样品的等等。所以在选择前要好好研究参数,仔细阅读说明书,才能找到合适的色谱柱和适宜的分离方法。
 

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